Boala celiacă: aspecte clinice de laborator. Instruire suplimentară de laborator Éva Kenesei 2016.05.18.

Boala celiacă: aspecte clinice de laborator Pregătirea în laborator Éva Kenesei 2016.05.18.

Subiecte Prezentare istorică, posibilități de diagnostic ESPGHAN descrierea ghidului clinic al bolii celiace. Direcția de dezvoltare a metodelor serologice Testele rapide Alte teste bazate pe anticorpi Noi candidați pentru biomarkeri

Anomalii generale de laborator în boala celiacă Anomalii care indică modificări morfologice și funcționale ale mucoasei intestinului subțire: Proteine totale serice scăzute Ca, P, Zn, Fe Număr de sânge, anemie feriprivă, Vitamine: D, A, E, K, folat, B12 Tipic scaun steatoreic> 4 g/zi Transport anormal al mucoasei intestinului subțire Test D-xiloză anormal Diagnosticul precis s-a bazat pe examinarea afectării mucoasei într-un specimen de biopsie subțire.

Revizuirea istorică a diagnosticului de boală celiacă înainte de 1960 - suspiciune clinică, simptome, biopsie - histologie 1971 Seah - anticorp reticulinic (ARA) - specific dar neacceptabil 1982 anticorp Gliadin (AGA) Sens 70%; Spec 70% 1983 Chorzelski - Endomysium anticorp IFA (EMA) Sens70 90%; Spec 100% 1997 Dieterich-țesut transglutaminază anticorp ELISA (ttg) Sens și Spec 90 95% 2005: Gliadină antideamidată: Sens 85%, Spec 90% HLA DQ teste genetice

Mecanismul de formare a anticorpilor împotriva gliadinei și transglutaminazei În boala celiacă, autoanticorpii caracteristici vizează proteina TG2. Anticorpii specifici sunt dependenți de gluten și sunt produși numai în purtătorii HLA-DQ2/DQ8.

Instrumentele de diagnostic Testarea anticorpilor specifici CD-ului Testarea HLA; Examen histologic de probă de biopsie a intestinului subțire HLA-DQ2 și HLA-DQ8

Anticorpi Autoanticorpii tipici vizează proteina TG2 în boala celiacă. Anti-tTG/TG2 (transglutaminază tisulară) IgA, anticorp IgG Endomysium (IgA) Anti-DGP (peptidă de gliandină deamidată) IgA, anticorp IgG anti-gliandină/anti-reticulină Anticorpii specifici sunt dependenți de gluten și sunt produși numai la persoanele care poartă HLA-DQ2/DQ8.

Anticorp transglutaminazic anti-țesut (ttg) Enzima se găsește în tot corpul (țesut cerebral, piele, intestine) Autoantigen principal în boala celiacă, antigen împotriva EMA Se produce în principal IgA anti-tg2, dar unii pacienți au și IgG. Fals pozitiv: pentru alte boli autoimune, infecții, tumori, leziuni tisulare Fals negativ: În caz de boală precoce sau ușoară, la copii de 10 ori: boala celiacă, atrofia severă a cheagurilor (Marsh3) este foarte probabilă. La un pacient simptomatic, confirmarea diagnosticului cu teste de laborator suplimentare (EMA, HLA) poate evita biopsia. Pentru testele de confirmare, proba trebuie prelevată la un timp diferit (datorită eliminării unei erori tehnice) În termen de jumătate de an de la începerea dietei, titrul IgA al ttg scade, titrul scăzând sub valoarea normală depinde de titrul inițial. În cazul unei diete fără gluten introdusă înainte de test, testul poate da un rezultat negativ!

Testul anticorpului peptidic gliadină deamidată (IgA și IgG) Testul detectează gliadina deamidată de ttg Mai sensibil și specific decât testul anticorp gliadină nemodificat Testul nu înlocuiește testul anticorp ttg, Rezultatul negativ (la persoanele care nu fac dietă) face ca boala celiacă să fie puțin probabilă Rezultatul singur nu confirmă și nici nu exclude boala. Este mai sensibil la boala celiacă decât anticorpul ttg la copiii cu vârsta sub doi ani, mucoasa este mai sensibilă la daune

Anticorp Endomysium IgA (EMA) Detectarea anticorpilor prin imunofluorescență indirectă Substrat: secțiune de țesut conținând mușchi neted (esofag de maimuță/cordon ombilical uman) Anticorp anti-IgA marcat FITC Antigen tisular Aproape 100% specific pentru boala celiacă Evaluare: negativ/pozitiv Dacă există EMA pozitivă poate indica boala celiacă chiar și cu un rezultat normal de biopsie.

Considerații de laborator Un laborator care efectuează diagnosticare specială a CD-ului ar trebui să fie implicat în continuu în testarea controlului intern și extern al calității. Testul aplicat trebuie validat, de exemplu: standardul de referință ema. Pot exista diferențe de sensibilitate, specificitate, prag normal între fiecare test, de exemplu: anti-ttg - există o generație diferită de teste Laboratorul trebuie să dea pragul normal superior al testului aplicat pentru EMA testați diluarea tăiată a dinților. Se poate da cea mai mare diluare la care testul este încă pozitiv. Indicați ce țesut folosește laboratorul ca substrat. Efectul potențial de recuperare (titru ridicat de anticorpi) trebuie luat în considerare în timpul testului.

Aspecte suplimentare ale vârstei pacientului sunt necesare pentru interpretarea corectă a nivelurilor serice ale IgA serice ale pacientului, la persoanele competente în IgA rezultatul anticorpului IgA este în primul rând obiceiurile de consum ale glutenului pacientului (în cazul unei diete fără gluten rezultatul negativ nu poate fi evaluat) pacient care primește tratament imunosupresor

Test serologic Sensibilitate% Specificitate% Anticorp izotip Anti-tTG 91-95 95-97 IgA și IgG Anti-endomisal 85-98 95-100 IgA Anti-gliadină 58-75 85-95 IgA și IgG Antideamidat gliadină peptidă 86-90 93-96 IgA și IgG Michael X Ma și colab. Dileme diagnostice în boala celiacă Expert Rev. Gastroenterol. Hepatol 7 (7), 643-655 (2013)

Endoscopie și biopsie, histopatologie Intestin subțire normal Boală celiacă intestin subțire Gluten Dieta fără gluten

Boala celiacă: o actualizare pentru patologi J Clin Pathol 2006 59 octombrie (10): 1008-1016 Clasificare MARCH modificată

Mai multe gene sunt implicate în dezvoltarea bolii Testarea genetică Unul sau ambii HLA DQ2/DQ8 sunt prezenți în mod constant, o condiție necesară pentru dezvoltarea bolii celiace, dar nu suficientă. Purtarea genei este puțin probabil să provoace boli, cu toate acestea, Anti TG2 și EMA găsite pe CD sunt produse numai la persoanele cu HLA-DQ2 sau DQ8. HLA + Gluten Boala celiacă

Tastarea HLA DQ2 și DQ8 HLA Are o valoare predictivă puternică negativă Găsită în> 95% dintre celiaci Purtă 25-30% din populația normală Valoare predictivă pozitivă slabă

ESPGHAN (Societatea Europeană pentru Gastroenterologie Pediatrică, Hepatologie și Ghiduri Nutritive pentru Diagnosticul Bolii Celiace) Ghid Clinic 2012

Pe cine ar trebui să examinăm? Grupa 1: copii și adulți cu simptome care nu pot fi explicate din alte motive Diaree cronică intermitentă Întârziere a creșterii, scădere în greutate Întârziere a pubertății, amenoree Anemie cu deficit de fier Greață, vărsături Durere abdominală Oboseală cronică Ulcere recurente Grupa 2: copii asimptomatici și adulți Sindromul Down tiroidă autoimună boală Sindromul Turner Deficiență IgA selectivă Boală hepatică autoimună Rudele de gradul I ale bolii celiace

De ce este necesar să se utilizeze un alt algoritm pentru simptomatic sau la pacienții asimptomatici, dar cu risc? 1. TG2 fals pozitiv sau tranzitoriu este mai frecvent la pacienții compromis genetic decât la pacienții simptomatici 2. În histologia normală (Marsh 0), titrul TG2 este în general scăzut, norma. valoarea superioară Creșterea de 10 ori a titrului IgA face ca diagnosticul CD Peptida gliadină antideamidată (IgA și IgG) sub 2 ani să fie mai sensibilă decât ttg Anti EMA IgA cele mai specifice și cele mai sensibile Anticorpii specifici pot fi absenți în timpul dietei fără gluten HLA DQ 2 și HLA DQ 8 Un rezultat negativ împiedică diagnosticul CD