Metode experimentale pentru determinarea solubilității
9.5 Metode experimentale pentru determinarea solubilității
În faza de descoperire chimică a cercetării medicamentelor, sunt necesare screening-ul rapid și clasificarea compușilor, caz în care sunt utilizate numai metode care oferă valori indicative de solubilitate pentru a determina solubilitatea. În această fază, obiectivul este măsurarea rapidă a zeci de mii de compuși, adică principala cerință pentru metodele aplicate este viteza, randamentul ridicat (HT). În general, metodele cu o capacitate mai mare de 50 de compuși/zi sunt considerate metode HT. În cercetarea exploratorie, solubilitatea cinetică a compușilor este determinată mai întâi prin dizolvarea probelor în DMSO (20-30 mM) și apoi prin adăugarea unor volume mici în tamponul apos. În primele momente de precipitație, partea insolubilă este îndepărtată și se măsoară concentrația soluției astfel formate.
În faza de dezvoltare a cercetării medicamentelor, este necesar să se determine solubilitatea termodinamică (de echilibru). Esența metodelor este că solidul este agitat direct în mediul apos, oferind în același timp un exces de material, la o temperatură dată pentru o perioadă mai lungă de timp, apoi stabilit și concentrația soluției saturate este măsurată într-un mod adecvat. O cerință esențială pentru metode este ca acestea să fie exacte și reproductibile.
Cele mai frecvent utilizate metode analitice pentru determinarea solubilității sunt prezentate în Tabelul IX-3. tabelul rezumă.
Tabelul IX: Metode analitice utilizate pentru a determina solubilitatea.
Metode de determinare a solubilității cinetice
Asa numitul. procedura nefelometrică după separarea soluției și a particulelor solide, împrăștierea luminii este măsurată cu un nefelometru cu laser și concentrația soluției este calculată din aceasta.
THE metoda UV directă după îndepărtarea fazei solide, se înregistrează spectrul soluției limpezi rămase. O soluție de referință este, de asemenea, preparată prin metoda de diluare. Și în acest caz, o anumită cantitate de probă trebuie dizolvată în solventul pH-ului și volumului dat, dar cantitatea de probă trebuie să fie mai mică pentru a preveni precipitarea. Spectrul este, de asemenea, înregistrat pentru soluția de referință, iar apoi pentru ambele spectre, raportul zonelor de sub curbă stă la baza evaluării.
Reelaborarea și robotizarea metodei clasice de pâlnie de agitare la tehnologia cu plăci cu 96 de godeuri a dus, de asemenea, la performanțe sporite. Probele sunt măsurate prin HPLC cu fază inversă de eluare cu gradient rapid. Capacitatea metodelor este mare, iar aplicarea lor poate determina solubilitatea cinetică. Cu toate acestea, precizia lor este limitată, deoarece se măsoară volume foarte mici și, de obicei, o măsurare se face la un pH. Un alt dezavantaj este că diferențele în solubilitatea diferitelor forme cristaline și polimorfe se pierd datorită dizolvării în DMSO.
9.5.2 Metode pentru determinarea solubilității termodinamice
Astăzi, există mai multe metode, așa-numita. metode modificate ale plăcilor („Metode de microtitrare cu echilibru modificat”) care transferă metoda clasică a pâlniei de agitare saturată la tehnologia automată a plăcilor cu 96 de godeuri. Scopul principal este creșterea performanței și reducerea cantității de material (probă, solvent) necesară.
Asa numitul. solubilitate de fază principiul măsurării solubilității în funcție de creșterea excesului de material. În timpul testului, se efectuează o serie de măsurători: cantități crescânde de substanță de testat sunt cântărite în volume egale de solvent. Soluțiile sunt agitate timp de câteva zile într-un sistem închis, apoi soluțiile sunt prelevate și concentrația lor determinată gravimetric. Valorile concentrației obținute sunt reprezentate grafic în funcție de volumele de eșantion măsurate, datele extrapolate la excesul zero pe grafic dau solubilitatea de echilibru. Dezavantajul acestei metode este, de asemenea, necesarul ridicat de muncă, timp și materiale, dar oferă date foarte precise.
THE "coloana generatorului ”metoda esența este că proba care urmează să fie examinată este aplicată pe suprafața mărgelelor de sticlă ambalate într-o coloană și apoi apa este pompată prin coloană. Echilibrul de saturație este stabilit rapid datorită zonei mari de contact dintre probă și apă. Concentrația lichidului eluat este determinată prin HPLC.
De asemenea, funcționează pe principiul titrării potențiometrice. "urmărind metoda echilibrului" (CheqSol). După titrarea normală, titrarea trebuie efectuată și la o concentrație de material în care precipită forma neionizată a probei. Precipitația este detectată de un detector UV prin intermediul unui cablu optic scufundat în soluție, ceea ce implică oprirea titrării. Astfel, măsurarea necesită furnizarea unei cantități de material la care compusul este încă complet dizolvat la pH-ul corespunzător formei sale ionizate, dar precipită sub forma unui precipitat la pH-ul formei sale neutre. După precipitații, prin adăugarea unei cantități mici de acid sau bază, provocând modificări de pH foarte mici, proba intră uneori în soluție și unde precipită din nou (variază între starea suprasaturată și saturată). S-a demonstrat că determinarea a opt astfel de puncte este suficientă pentru stabilirea echilibrului. După forțarea echilibrului, solubilitatea poate fi calculată. Timpul unei măsurători este scurtat la 60-90 de minute. Metoda este potrivită atât pentru determinarea solubilității echilibrului, cât și a celor cinetice, a cerințelor materiale reduse, automatizată și bine reproductibilă. Dezavantajul acestei metode este că este potrivit numai pentru determinarea solubilității compușilor ionizabili.
- Dependența de alcool - Metode de renunțare - Renunțarea la băut sau fumat
- Am renunțat la fumat și viața mea s-a schimbat - Dependența de alcool - Moduri de a renunța
- Dependența de alcool - Metode de renunțare, cât voi corecta dacă renunț la fumat
- Tipuri și metode de terapie de detoxifiere, Metode de detoxifiere extracorporală
- Metode moderne de tratament al paraziților, Tratamentul și prevenirea infecțiilor parazitare, Paraziți în