În spatele scenelor

Cu seria noastră „În spatele scenei”, avem o privire asupra vieții laboratorului de embrioni din Centrul de fertilitate Reprosys, cu scrierile noastre scurte am dori să îi ajutăm pe toți cei interesați să înțeleagă știința din spatele programului balon.

Partea 1: FIV tradițional
Partea 2: ICS
Partea 3: zigot
Partea 4: Embrion
Partea 5: embrion celular 6-8
Partea 6: Morula
Partea 7: Blastocist
Partea 8: Încorporarea
Partea 9: AHA
Partea 10: Vitrificare
Partea 11: Dezvoltarea embrionară în imagini
Partea 12: Analiza spermei
Partea 13: Test HBA
Partea 14 Fragmentarea ADN-ului

Ziua 0: Inseminare convențională (FIV convențional)

Ziua aspirării ovocitelor (puncție ovocitară) și pregătirea spermei. Un ou matur cu un corp polar fertilizează într-un mod similar naturii cu un partener cu o imagine normală a spermei și un test de fertilitate bun. Procedând astfel, spermatozoizii ajung în ovul prin stratul de cumulus care acoperă ovocitele și apoi unul dintre ei efectuează fertilizarea printr-un proces biochimic complex.

Ziua 0: ICSI (injecție intra-citoplasmatică a spermei)

Un ou matur cu corp polar poate fi fertilizat chiar dacă membrul masculin al cuplului are problema. În cazul unui partener cu o imagine anormală a spermei și un test de fertilitate slab, este necesar să se introducă sperma în ovul printr-o procedură de micromanipulare. În timpul ICSI, ovulul este fixat cu o pipetă de susținere, în timp ce o altă pipetă foarte subțire este utilizată pentru a livra sperma evaluată cel mai bine în interiorul ovulului.

Oul fertilizat, zigotul, este caracterizat de 2 progenitori (pronucleus) și 2 corpuri polare. Această afecțiune este vizibilă la 8-14 ore după fertilizare timp de 4-5 ore. Cei doi progenitori (materni, paterni) sunt dispuși unul lângă altul în mijlocul ovulului, urmat de prima diviziune celulară. Dacă pronucleul nu este vizibil în ovul în acest moment, ovulul este considerat infertil.

Prima diviziune celulară a embrionilor prae are loc de obicei între 20 și 27 de ore după fertilizare. În a doua zi, acești embrioni sunt deja în starea de 2-4 celule. În mod ideal, se observă o diviziune sincronă, blastomerele sunt de formă regulată, de dimensiuni similare, fragmente, vacuole sunt prezente în număr mic. Comunicarea se dezvoltă între celulele embrionului.

Partea 5: Ziua 3 - 6-8 embrion celular

Embrionii ajung la 6-8 diviziuni celulare până în a treia zi. Aceasta poate fi data transferului de embrioni (transfer de embrioni) dacă numărul și calitatea embrionilor pot fi folosiți pentru a decide ce embrioni vor fi transferați. Acești embrioni trebuie să îndeplinească următoarele criterii: se observă diviziune sincronă, blastomerii au o formă regulată, au dimensiuni similare, fragmente, vacuoli sunt prezenți în număr mic, există un grad ridicat de asociere între celule.

Dacă există mai mult de 3-5 embrioni la fel de buni, dacă este necesar, continuăm să-i cultivăm până în a cincea zi.

Partea 6: Ziua 4 - Morula

Diviziunea inițială a embrionilor este controlată de stocul genetic al ovulului, atingând apoi o stare de 4-8 celule, trebuie activat propriul stoc genetic total al embrionului, dacă acest lucru nu se întâmplă, dezvoltarea embrionului se oprește, acesta este numit blocul de dezvoltare.

În a patra zi, un moment de cotitură foarte important în viața embrionilor, în starea celulară 12-16, celulele sale se compactează, aderă una la alta cu conexiuni celulare strânse, limitele celulare dispar, iar celulele independente devin o celulă coerentă grup (morula). În această zi nu va avea loc niciun transplant de embrioni.

partea: ziua 5 - Blastocist

În a cincea zi după fertilizare, embrionii corespunzători se dezvoltă în blastociste, cu un număr de celule care se apropie de o sută. Aceste numeroase celule sunt deja prezente într-o stare diferențiată. Se formează un strat celular exterior (trofoblast), care joacă ulterior un rol în formarea placentei, înconjurând o cavitate plină de lichid (blastocoel) în care atârnă masa celulară internă a nodulului embrionar. Fătul se dezvoltă din nodul embrionar.

Un sistem de evaluare detaliat este utilizat pentru a examina pre-embrioni în starea de blastocist, pe baza căruia unul sau doi embrioni sunt cei mai potriviți pentru replantare. Un fenomen interesant este atunci când embrionul dilatat, expandat pulsează (se contractă și se extinde) înainte de a părăsi zona.

Partea 8: Încorporarea

Embrionii implantați ies din teacă și se încorporează în uter în jurul zilei 7.

În mod neobișnuit, dorim să arătăm acest proces cu un videoclip:

Partea 8: Eclozare asistată (AHA)

Embrionul este înconjurat de un plic, aceasta este zona pellucida. Embrionii care ajung în cavitatea uterină trebuie să iasă din acest plic pentru a fi încorporați. Acest proces eclozează. În unele cazuri (vârstă, zona groasă pelucidă) poate fi necesară subțierea și deschiderea învelișului embrionului. Acest proces de micromanipulare este eclozarea asistată care poate fi realizată prin proces mecanic, chimic sau laser.

Partea 10: Vitrificare

Embrionii abundenți de cinci zile, care nu sunt implantați și sunt de bună calitate, pot fi depozitați congelați. Sunt cunoscute două tipuri de tehnici de crioconservare, congelarea lentă și vitrificarea mai sofisticată. În institutul nostru, preferăm ultima metodă ultrarapidă. În timpul vitrificării, cea mai mare parte a conținutului de apă al embrionilor este extrasă, pentru a ajuta acest lucru, fluidul blastocoel este drenat printr-o tehnică similară cu eclozarea asistată, iar apoi embrionii sunt plasați într-o serie specială de soluții, ceea ce are ca rezultat și o scădere în conținutul de apă. Acest lucru minimizează formarea cristalelor de gheață dăunătoare și stabilizează structura embrionilor. Embrionii sunt depozitați pe purtători în azot lichid la -196 ° C. În condiții neschimbate, embrionii pot fi depozitați la nesfârșit. Depozitarea congelată a embrionilor este o metodă larg răspândită și bine stabilită.

Partea 11: Dezvoltarea embrionară în imagini

De la ovul până la blastocist, sunt disponibile doar câteva zile pentru a monitoriza soarta embrionilor. Am dori să prezentăm această dezvoltare cu ajutorul unei diagrame.

Partea 12: Analiza spermei

După o perioadă de păstrare de 3-5 zile, rezultatul probei de material seminal prezentat pe o foaie de evaluare (spermatogramă-SPG) este comparat cu următoarele limite ale OMS:

Volum: minim 1,5 ml
Concentrație: minim 15 milioane/ml
Numărul total de spermatozoizi: minimum 39 milioane/probă
Motilitate: minim 40%
Morfologie: minim 4% normal

Valorile corespunzătoare se încadrează în categoria normozoospermiei. Evaluarea rezultatului este în toate cazurile responsabilitatea unui androlog.

Laboratorul nostru de gamete are o CERTIFICARE QuaDeGA acreditată la nivel internațional.

Partea 13: Test HBA (test de legare a hialuronului)

Testul HBA este o metodă de determinare a proporției de spermă matură în ejaculatul proaspăt, pe baza capacității spermatozoizilor maturi de a lega acidul hialuronic. Acesta este un pas în procesul de fertilizare. În natură, numai spermatozoizii cu un receptor matur care leagă acidul hialuronic se pot lega de acidul hialuronic din ovul. Lipsa acestui fapt poate sta la baza problemei infertilității de origine necunoscută.

Rezultatul testului nu este în niciun caz suficient pentru a diagnostica o posibilă fertilitate, dar poate ajuta la selectarea opțiunilor ulterioare de tratament cu FIV ale cuplului.

Partea 14 Fragmentarea ADN-ului

Fragmentarea ADN este fragmentarea ADN-ului celulei spermatozoizilor care poate fi cauzată de mai multe lucruri, precum: vârsta înaintată, fumatul, consumul excesiv de alcool, malnutriția, obezitatea, inflamația, stresul. Fertilitatea spermatozoizilor cu ADN fragmentat scade și riscul avortului prematur crește în timpul sarcinii.
Există mai multe teste pentru detectarea fragmentării ADN-ului. În centrul nostru de fertilitate este disponibil testul SCSA (Sperm Chromatin Structure Assay), care testează zeci de mii de spermatozoizi într-un timp scurt. Deteriorarea ADN-ului spermei este exprimată ca procent. Dacă peste 30 la sută din spermatozoizi sunt consultați în consultare cu andrologul nostru fragmentat, pot fi sugerate mai multe soluții.