EXAMENUL FINAL ORAL I. LINIA. 2. Metode de determinare a proteinelor serice, electroforeză

Recomandați documente

EXAMENUL FINAL ORAL - I. ARTICOLUL DE CHIMIE CLINICĂ DE LINIE 1. Individ de referință, valoare de referință, interval de referință. Referință individuală, valoare și tipuri de referință, interval de referință. Selectarea indivizilor de referință: metodă directă, indirectă, criterii de excludere. Stabilirea limitelor de referință. Transformabilitatea valorii de referință.

2. Metode de determinare a proteinelor serice, electroforeză. Proteine serice. Fracții majore de proteine din ser. Albumină, α1-, α2-, β-, γ-globulină. Concentrații mai mici de ser. Proteine din urină și lichior. Electroforeză. Principiul. Mobilitate electroforetică. Echipamente electroforetice. Efectuarea electroforezei. Purtători. Probleme de electroforeză. Imunoelectroforeză. Imunoglobuline. Tipuri. Structura. Detectarea și tipurile de gammopatie monoclonală. Fixarea imună. Proteina Bence Jones. Lanțuri ușoare gratuite. Gammopatie. Boală de lanț severă. Electroforeză bidimensională. Tehnici de blotare.

3. Metode de determinare a ionilor, distribuția analizorilor de ioni Na +, K +, Cl- în corp, intervalele lor de referință. Cauza hipo/hipernatremiei, hipo/hiperkaliemiei, pseudohiponatremiei, pseudohiperpotasemiei. Metode comune de determinare a ionilor astăzi, potențiometrie directă și indirectă. Analizoare de ioni Baza de bază a măsurării ionice selective (esența ecuației Nernst), tipurile de electrod, părțile lor, rolul electrodului de referință. Tipuri de eșantioane, modul de intrare și transmisie a eșantionului, rolul aerului. Soluții de sistem: calibratoare, soluții de referință, compensator pe bază de ser, soluție de spălare. Caracteristicile analizorului de ioni: potențialul electrodului, ecuația de calibrare, mesaje de eroare, sarcini. Calibrare automată și manuală. Controlul calității: măsurare și arhivare QC.

4. pH-ul sângelui și pCO2, pO2, osmolalitate Modificări ale gazelor din sânge în timpul respirației, reglării respiratorii și metabolice. Modificări ale oxigenului dizolvat și CO2 din sânge. Relația dintre legea gazelor, concentrația gazelor din sânge și presiunea parțială. Sisteme tampon de sânge: acid carbonic/bicarbonat (ecuația Handerson-Hasselbach), oxihemoglobină/Hb (saturație de oxigen) și rolul tamponului fosfat. Eșantionare, tipuri de eșantioane, pO2, pCO2, măsurare pH, pH fiziologic, exces de bază (BE). Conceptul de deficit de anioni și de bicarbonat total, valoarea sa fiziologică. Parametri măsurabili pe analizorii de gaze din sânge de astăzi. Conceptul de osmolalitate, semnificația sa clinică. Proprietăți colective ale soluțiilor (îngheț, fierbere, reducerea punctului de rouă, legea lui Raoult). Tipuri de osmometre: principiul dispozitivelor de măsurare a punctului de rouă și scăderii punctului de îngheț, tipuri de probe, interval de măsurare. Osmolalitatea calculată.

5. Enzimologia clinică și determinarea alfa-amilazei Originea enzimelor în ser, distribuția enzimelor în organe. Factori care modifică activitatea enzimei (sinteză, eliberare, eliminare, activatori, inhibitori, hemoliză). Formele enzimatice din ser: izoenzime specifice organelor, izoforme (macroenzime), perioade de înjumătățire enzimatică. Criterii pentru aplicarea diagnosticului enzimelor. Optimizarea determinării activității enzimei: reacție enzimatică, indicator/reacție cuplată, exces de substrat artificial. Standardizare: metoda IFCC, unitate de măsură. Determinarea lipazei, a-amilazei și a importanței enzimelor rar măsurate. Determinarea izoenzimelor.

6. Determinarea activității GOT, GPT, colinesterazei Rolul diagnostic al transaminazelor GOT (AST), GPT (ALT). Modificarea coeficientului De Ritis ALT/AST la pacienții cu leziuni hepatice și miocardice. Determinarea activității enzimatice astăzi: efectul grupului protetic al fosfatului piridoxal (P-5’-P) și al ionilor metalici. Rolul enzimei auxiliare și al cofactorului NADH în răspunsul indicatorului. Faza de întârziere, liniaritate. Determinarea colinesterazei, rolul variantelor genetice în timpul anesteziei, otrăviri.

7. Determinarea activității LDH, CK, lipazei Apariția izoenzimelor LDH în diferite organe, cauze ale creșterii acestuia (LDH1/LDH2). Metoda IFCC și domeniul de referință pentru determinarea LDH. Apariția creatin kinazei și izoenzimelor în diferite organe. Metode pentru determinarea activității CK și a izoenzimelor. Criterii de determinare a activității CK-MB, metoda de determinare a masei CK-MB. Lipaza: rolul său fiziologic, localizare, modificări ale pancreatitei, determinarea actuală a lipazei colorimetrice.

8. Metode de determinare a fosfatazelor, a activității γGT. Fosfataza alcalină. Dependența de pH, semnificația clinică. Metoda ALP IFCC și determinarea izoenzimelor. Dependența PH și originea fosfatazei acide. Rolul diagnosticului și determinarea izoenzimei specifice prostatei. Localizarea și modificarea γGT în boli. Comparație cu fosfataza alcalină.

9. Determinarea glucozei, fructozaminei, hemoglobinei glicate. Rolul fiziologic al glucozei, structura, formele și proprietățile sale educaționale. Glucoza vs zahar. Gluconeogeneză, glicogenoliză. Efectele insulinei și glucagonului. Tipuri de diabet zaharat. Diabet: teste de diagnostic, teste terapeutice. Valorile glucozei la jeun. Hipoglicemie, hiperglicemie. Probele de testare a glucozei. Metode de determinare a glucozei: convenționale, enzimatice, pierderea în greutate a O2, neinvazive. Reacția lui Maillard. Fracțiuni de hemoglobină. Hemoglobina glicată. Reacția hemoglobinei cu glucoza. HbA1C, HbA1. Metode de determinare a hemoglobinei glicate: chimică, electroforeză, imunochimie, cromatografie cu schimb de cationi, cromatografie de afinitate. Probleme cu determinarea HbA1C: alte fracții, timp de înjumătățire, reacție nespecifică Proteine serice glicate: fructozamină. Formarea fructozaminei. Metode de determinare. Compararea metodelor de determinare. Caracterizarea metabolismului glucidic: folosind glucoză, fructozamină, HbA1C.

10. Metode de determinare a ureei, creatininei, acidului uric. Parametrii de laborator ai funcției renale. Funcțiile rinichilor și caracteristicile acestora. Clearence și calcul. Azotemie. Metode de determinare a ureei: directă (Fearon), enzimatică (măsurarea NH4 +: Berthelot, GLDH, conductivitate). Gama de referință a ureei și metodele de măsurare interne. Creatinină. Fiziologic

importanţă. Clearance endogenă a creatininei: măsurare, calcul. Reacția Jaffe și modificările sale. Determinarea enzimatică (creatininhidrolază). Semnificația clinică a acidului uric. metode de determinare: acid tungstic fosforic, reacții enzimatice (uricază) și conexe. Metoda definitivă. Gama de referință creatinină.

11. Determinarea bilirubinei, amoniacului, lactatului. Parametrii funcției hepatice. Funcțiile ficatului. Bilirubina: formare, forme (conjugate, neconjugate, delta). Definiția eșantionului. Metode de determinare: Contele Jendrassik și reactivii săi, metoda DPD, determinarea bilirubinei delta. Domeniul de referință și metodele de determinare. Semnificația clinică a determinării amoniacului. Probă. Metode de determinare: proces chimic, enzimatic. Metabolismul lactatului. Probă. Metode de determinare: chimică (oxidativă), enzimatică. (LDH și NADH), biosenzor. Gama de referință pentru amoniac și lactat.

12. Metode de testare pentru lipide și lipoproteine. Structura lipidelor. Colesterol, trigliceride, fosfolipide. Fracții lipoproteice serice. Diferențierea hiperlipoproteinemiilor prin proceduri vizuale și electroforetice. Probă de testare. Performanța și evaluarea electroforezei lipoproteinelor. Metode de determinare a colesterolului: direct (extracție), chimic (Liberman-Burchard, Zlatkis și Zak), enzimatic (măsurare colesterol oxidază și H2O2). Determinarea colesterolului HDL: precipitații și măsurare directă. Calculul LDL-colesterol și erori. Studiu Framingham. Recomandări pentru determinarea colesterolului. Trigliceride. Structura. Metode de determinare: chimică (extracție), enzimatică. Determinarea glicerolului. Rolul glicerolului liber. Concentrația recomandată (de dorit) și metoda de determinare a colesterolului, a trigliceridelor.

13. Testul urinei. Caracterizarea generală a urinei. Afirmația „test” - „pozitivitate”. Benzi de testare: principiu, funcționare, utilizare. Probă de urină: mic dejun, spontan, mediu, colectat și conservanți. Examen fizic: culoare, turbiditate, miros. Teste cantitative: densitate, proteină/albumină, glucoză,

celule albe din sânge, urobilinogen. Urină: pH, bilirubină, cetonă, hemoglobină, nitriți. Sediment urinar: construcție, evaluare: elemente celulare (RBC, fvs, urotel, scuamoase, fungice, bacteriene.), Cristale (oxalat, urat, fosfat, tirozină, colesterol, cistină.). Dispozitive de testare a urinei: analizor de benzi testate (CLINITEK), analizor automat de urină.

14. Considerații privind selectarea și instalarea instrumentelor Ce considerații pot fi utilizate pentru a configura un nou analizor. Oportunități de cumpărare. Condiții tehnice de amplasare: dimensiune, extensibilitate, rețea electrică, caracteristicile unui sistem de apă adecvat, tratarea apelor uzate, comunicare online. Purificarea aerului de laborator, schimb adecvat de aer, aer condiționat.

Cerere de post, interviu. Motive pentru angajarea unui nou angajat. Cerințe formale și de conținut ale unui CV profesional scurt. Anunț de post, metodă de discuție, aspecte de decizie. Principiul încadrării ca funcționar public, salariu. Așteptări pentru profesioniștii de laborator.

15. Analizoare chimice clinice, sisteme deschise și închise. Părți ale unui analizor de chimie clinică. Amplasarea probelor și reactivilor pe instrument, dozarea acestora. Tipul și controlul cuvetelor, caracteristicile unității fotometrice, care trebuie efectuate cu fluidul incubatorului. Moduri de măsurare: urmărirea punctelor finale și măsurători cinetice pe automat. Caracteristicile procesului de măsurare: sensibilitate, linearitate, deviere de la valorile țintă (părtinire), variabilitate analitică în cadrul seriei. Parametri de măsurare: limita de absorbanță, limita de liniaritate, timpul de măsurare. Controlul calității (reprezentarea QC Levy-Jenings, arhivare), calibrare. Verificarea rezultatelor măsurătorilor: limita de detectare, probe, limita de absorbție, epuizarea substratului. Caracterizarea unui automat chimic Beckman-Coulter: eșantion și braț reactiv, detectarea probei. Tipul și spălarea cuvetelor, sistem optic. Avantajele și dezavantajele sistemelor deschise și închise.

16. Încercări chimice uscate și sisteme modulare Principiul analizatoarelor chimice uscate: reflectanța, structura lamelelor, depozitarea, capacitatea, eșantionul. Construirea unui analizor chimic uscat. Cartuș (pachet de diapozitive), tipuri de diapozitive: fotometric, potențiometric. Măsurarea orbului. Caracteristici ale analizorului chimic vitros. Comparația chimiei uscate cu chimia umedă. Tehnologia cipurilor. Sisteme modulare de laborator: principiu, piese, metodă de transmitere a probelor, elemente de meniu pe ecran, combinație și supraveghere a modulelor. Condiții de consolidare în laborator, caracteristici ale sistemului integrat, pre/postanaliză, module analitice, analiți măsurabili pe unitățile HIA și HETIA, rolul indicelui seric.

17. Studii POCT. Testarea punctului de îngrijire (POCT). Tendințele de astăzi în testarea de laborator. În ce loc este oportun să se efectueze aceste teste, reglementarea lor. Cele mai frecvente teste POCT. Cine o poate face și unde? Coordonator POCT. Relația dintre studiile POCT și laboratorul central. POCT: protrombină, INR, analiza ionilor/gazelor din sânge.

18. Concepte toxicologice de bază și plumb Otravă, otrăviri, efecte secundare, factori care influențează efectul, substanțe psihotrope, narcotice, agenți de corp, pesticide, gaze toxice. Definițiile lor. Apariție, toxicitate, distribuție în organism, excreție de plumb. Concentrațiile serice și de plumb din sânge: copil și adult. Tratamentul otrăvirii cu plumb. Definirea plumbului. Prevenirea.

19. Farmacocinetica generală; monitorizarea medicamentelor antiepileptice și imunosupresoare. Conceptul de medicină. Distribuție în organism, metabolism, eliminare. Medicamente cinetice de ordinul întâi și zero. Monitorizare: Concentrații de vârf și vale. Măsurarea concentrației medicamentului: compararea metodelor imunochimice și a analizelor pe bază de HPLC.

20. Finanțarea de laborator. Analiza costului. Rentabilitatea laboratorului. Finanțarea spitalului, Fondul Național de Sănătate. Numărul codului testului, scor. Rambursarea pentru pacienți, rambursarea pentru pacienții din spital, Alte resurse financiare ale spitalului. Asistență primară și finanțare pentru spitalizare. Finanțare de laborator, buget, finanțare internă. Cheltuieli generale de spital. Departament profitabil, cu pierderi. Test urgent de laborator. Finanțarea internă, formarea de interese. Analiza costurilor de laborator, opțiuni de reducere a costurilor. Diagrama procesului de teste de laborator, indicatori de cost: teste/cost real, cost minim, raportul lor este punctul OEP și HUF/punct. Analiza unui departament: teste, instrumente, personal, număr de teste, rentabilitatea laboratorului.

21. Asigurarea calității, controlul calității intern și extern. Asigurarea/managementul calității: DEFINIȚIE. Elemente cheie și procese de asigurare a calității (QA). Variabile prenalitice, analitice și post-analitice. Controlul calității (QC). Controlați probele și caracteristicile acestora. Carduri de control: Levey-Jennings, reguli Westgard, cumulativ, reprezentare Youden. Corelație clinică, verificare delta, verificare limită. Posibile cauze ale erorilor, scor Z. Selectarea, implementarea și operarea QC extern. Sisteme externe de control al calității: QualiCont, Labquality.

22. Izolarea acidului nucleic. Caracterizarea metodelor de izolare a ADN-ului reacției PCR: clasice, manuale, automatizate. Eficiența extracției ADN-ului. Probă de ADN

puritate, capacitate de stocare și utilizare. Particularitățile extracției ARN. Reactivi necesari pentru reacția PCR. Etape PCR. Caracterizarea și aplicabilitatea produselor de reacție.

23. Proceduri de detectare a mutațiilor și aplicarea lor practică. Tipuri de mutații. RFLP (digestia enzimei de restricție și analiza produsului), secvențierea ADN-ului.

24. Metode de testare imunochimice și aplicarea lor în endocrinologie. Reacții de anticorpi antigeni. Turbidimetrie imună și nefelometrie imună. Testele imune (ELISA): opțiuni de etichetare (radio, enzimă, luminiscență), metode de testare a proteinelor și aplicarea acestora, proteine: CRP, determinarea imunochimică a albuminei. TSH (testul hormonului stimulator al tiroidei (radioimunoză necompetitivă), testul tiroxinei (T4) (radioimunosazie competitivă).